извор
Липаза се широко налази у животињама, биљкама и микроорганизмима. Биљке које садрже више липазе су семе уљарица, као што су семе рицинуса и уљане репице. Када семе уљарица клија, липаза може да ради у спрези са другим ензимима да катализује разградњу уља и масти за производњу шећера, обезбеђујући семену способност да пусти корен. Хранљиве материје и енергија неопходне за клијање; панкреас и масно ткиво виших животиња садрже више липазе у животињском телу. У цревном соку постоји мала количина липазе, која се користи да допуни недостатак варења масти помоћу липазе панкреаса. Код месождера, желудачни сок садржи малу количину бутириназе. Код животиња, различите врсте липаза контролишу процесе као што су варење, апсорпција, реконструкција масти и метаболизам липопротеина; липазе су обилније у бактеријама, гљивама и квасцима (Пандеи ет ал.). Пошто постоји много врста микроорганизама, они се брзо размножавају и склони су генетским варијацијама, имају шири пХ опсег, температурни опсег и специфичност супстрата од животиња и биљака, а липазе изведене из микроорганизама су генерално излучени екстрацелуларни ензими. Главни микроорганизми ферментације су Аспергиллус нигер, Цандида итд. Погодан је за индустријску производњу великих размера и добијање узорака високе чистоће. Стога је микробна липаза важан извор индустријске липазе. Генерално, својства липазе из различитих извора су различита и такође је од великог значаја у теоријским истраживањима.
природа
Липаза је врста ензима са различитим каталитичким способностима. Може да катализује хидролизу, алкохолизу, етерификацију, трансетерификацију и реверзну синтезу триацилглицерида и других естара нерастворљивих у води. Поред тога, испољава и друге ензимске активности, као што су фосфолипаза, лизофосфолипаза, холестерол естераза, активност ацилпептид хидролазе, итд. (Хара; Сцхмид). Различите активности липазе зависе од карактеристика реакционог система, као што је подстицање хидролизе естра на интерфејсу уље-вода, док се ензимска синтеза и трансестерификација могу постићи у органској фази.
Истраживање својстава липазе углавном обухвата аспекте као што су оптимална температура и пХ, стабилност температуре и пХ, специфичност супстрата, итд. До данас је изолован, пречишћен велики број микробних липаза и проучавана су њихова својства и разликују се по молекуларној тежини, оптималном пХ, оптималној температури, пХ и термичкој стабилности, изоелектричној тачки и другим биохемијским особинама (Веерарагаван ет ал.). Уопштено говорећи, микробне липазе имају шири радни пХ и опсег радне температуре од животињских и биљних липаза, високу стабилност и активност и специфичне су за супстрате (Сцхмид ет ал.; Казлаускас ет ал.).
Каталитичка карактеристика липазе је да је њена каталитичка активност највећа на граници уље-вода. Сарда и Деснелв су открили овај феномен још 1958. Ензими растворљиви у води делују на супстрате нерастворљиве у води, а реакција се дешава на граници две потпуно различите фазе које су одвојене једна од друге. Ово је карактеристика која разликује липазу од естеразе. Супстрат естеразе (Е Ц3.1.1.1) је растворљив у води, а његов оптимални супстрат су естри формирани од кратколанчаних масних киселина (мање или једнако Ц8).
Липаза је један од важних индустријских ензимских препарата. Може катализирати липолизу, трансестерификацију, синтезу естара и друге реакције, а широко се користи у преради уља, храни, медицини, свакодневној хемијској и другим индустријама. Липазе из различитих извора имају различите каталитичке карактеристике и каталитичке активности. Међу њима, производња липаза великих размера са функцијама трансестерификације или естерификације за синтезу органске фазе је од великог значаја за ензимску синтезу финих хемикалија и хиралних једињења.
Липаза је специјална хидролаза естарске везе која делује на естарске везе триглицерида да разгради триглицериде у диглицериде, моноглицериде, глицерол и масне киселине.
Ензим је активан протеин. Дакле, сви фактори који утичу на активност протеина утичу на активност ензима. На активност ензима у интеракцији са супстратима утичу многи фактори као што су температура, пХ вредност, концентрација раствора ензима, концентрација супстрата, активатори или инхибитори ензима итд.
Липаза је широко распрострањена међу микроорганизмима, а њене бактерије које производе су углавном плесни и бактерије. Постоје 33 објављене липазе из различитих извора погодних за обраду триглицерида, од којих је 18 из плесни и 7 из бактерија.
Липаза може да хидролизује глицериде (уље, маст) и ослобађа масне киселине, диглицериде, моноглицериде и глицерол у различитим фазама. Масне киселине настале хидролизом могу се титрирати стандардним алкалним раствором, а вредност титра представља активност ензима.
Каталитички механизам липазе
Липаза има афинитет према интерфејсу уље-вода и може катализовати хидролизу липидних супстанци нерастворљивих у води великом брзином на граници уље-вода; липаза делује на хидрофилно-хидрофобни интерфејс слој система, што се такође разликује од карактеристике естеразе.
Липазе из различитих извора могу имати велике разлике у секвенцама аминокиселина, али су њихове терцијарне структуре веома сличне. Остаци активног места липазе се састоје од серина, аспарагинске киселине и хистидина и припадају класи серинских протеаза. Каталитичко место липазе је закопано у молекулу, а његова површина је прекривена спиралном структуром налик на капицу формираном од релативно хидрофобних аминокиселинских остатака (такође познатих као „поклопац“), који штити каталитичко место триплета. Амфипатска природа -хеликса у "поклопцу" ће утицати на способност везивања липазе за супстрат на граници уље-вода, а њена ослабљена амфипатичност ће довести до смањења активности липазе. Спољашња површина "поклопца" је релативно хидрофилна, док је унутрашња, окренута површина, релативно хидрофобна. Због повезаности између липазе и интерфејса уље-вода, "поклопац" се отвара и активно место је изложено, што повећава способност везивања супстрата за липазу. Супстрат може лако ући у хидрофобни канал и комбиновати се са активним местом да би формирао комплекс ензим-супстрат. Феномен међуфазне активације може повећати хидрофобност у близини каталитичког места, узрокујући преоријентацију -хеликса, чиме се излаже каталитичко место; присуство интерфејса такође може омогућити ензиму да формира непотпуни хидратациони слој, што је корисно за алифатско формирање хидрофобних супстрата. Бочни ланци се савијају на површину молекула ензима, чинећи ензимску катализу лакшим.
Ако желите да сазнате више, контактирајтеsales@sxytbio.com,Кликните овде да бисте нас контактирали на мрежи
